Thermo Scientific™ phi29 DNA Polymerase (10 U/μL)

L’ADN polymérase Thermo Scientific phi29 est une polymérase présentant une processivité très élevée (jusqu’à plus de 70 kb) avec une forte activité de déplacement des brins, ce qui favorise une amplification isothermique de l’ADN hautement efficace. L’ADN polymérase phi29 possède également une activité (corrective) exonucléase 3’→5’ qui agit préférentiellement sur l’ADN ou l’ARN simple brin. Les amorces modifiées 3’ sont donc fortement recommandées.

Points clés

• Plus grande processivité et activité de déplacement des brins parmi les ADN polymérases connus : des segments d’ADN de plus de 70 kb de long peuvent être synthétisés
• Synthèse très précise de l’ADN
• Rendements extrêmement élevés d’ADN amplifié même à partir de quantités infimes de gabarits
• Les produits d’amplification peuvent être directement utilisés dans des applications en aval (PCR, digestion par restriction, génotypage SNP, etc.)

Applications

• Amplification en cercle roulant (RCA) : génération de nanogabarits d’ADN périodiques
• Amplification par déplacement multiple (MDA)
• Amplification non biaisée du génome entier (WGA, voir la figure 1 dans les données à l’appui) :
• amplification de l’ADN pour la détection SNP et STR
• amplification de l’ADN sans cellules à partir d’une cellule unique
• organismes pathogènes ou métagénomes
• amplification d’ADN à partir d’échantillons de tâches de sang sur papier-filtre
• Préparation du modèle d’ADN pour le séquençage
• Amplification d’ADN amorcé par des protéines
• Génotypage in situ à l’aide de sondes-cadenas
• Clonage basé sur la recombinaison
• Clonage sans cellules d’ADN létal
• Amplification d’ADN amorcé par ARN

Remarque

L’ajout de pyrophosphatase au mélange réactionnel avec l’ADN polymérase phi29 peut améliorer la synthèse de l’ADN.

L’utilisation de cette enzyme dans certaines applications peut être couverte par des brevets et peut nécessiter une licence.