Thermo Scientific™ Pierce™ Recombinant Protein A Agarose

L’agarose protéine A recombinante Pierce utilise une forme génétiquement modifiée de protéine A qui est produite dans E. coli puis immobilisée sur l’agarose perlée réticulée à 6 % (CL-6B). Bien que certaines régions non essentielles aient été supprimées, la recombinaison est similaire à la protéine A native au niveau de sa taille et des domaines de liaison aux IgG. La protéine possède quatre sites de liaison à haute affinité capables de se lier spécifiquement à la région Fc de molécules d’immunoglobulines de plusieurs espèces. Certains chercheurs préfèrent utiliser une résine d’affinité basée sur la forme recombinante de la protéine A dans des applications particulières où l’expérience pratique indique qu’une source de production différente (E. coli vs S. aureus) fournit moins de liaison non spécifique ou des niveaux inférieurs de contamination par l’endotoxine. Sinon, les résines de protéines A natives fournissent généralement une purification d’anticorps de plus grande capacité.

Points clés :

• Protéine A immobilisée : lie spécifiquement les IgG de plusieurs espèces de mammifères, en particulier la plupart des sous-types d’IgG humaine et de lapin.
• Capacité standard : la charge de la protéine A immobilisée fournit une capacité de liaison de 15 à 17 mg d’IgG humaine par millilitre de résine.
• Résine d’agarose : agarose perlée réticulée à 6 % pour les méthodes de purification par affinité de petite colonne ou lots.

Propriétés de l’agarose perlée réticulée à 6 % (CL-6B) :

• Stabilité du pH : 2 à 14 (court terme) ; 3 à 13 (long terme)
• Taille moyenne des particules : 45 à 165 microns
• Limite d’exclusion : 10 000 à 4 000 000 daltons
• Débit volumétrique maximal : environ 1 ml/minute (pour une colonne de 1 cm de diamètre)
• Vitesse linéaire maximale : 30 cm/heure
• Pression maximale : moins de 25 psi (1,5 bar), définie comme la chute de pression maximale dans une colonne que la résine peut supporter (remarque : Il est possible que la pression manométrique indiquée sur un appareil de chromatographie en phase liquide mesure la pression totale du système plutôt que la chute de pression dans la colonne.)